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Capture Hi-C技术是在Hi-C文库基础上针对目标区域(如启动子区、增强子区、性状相关SNP位点)设计探针进行捕获后测序,能够大幅减少无效数据量,相同测序成本下可显著提升目标区域的覆盖深度。

建库流程基于常规Hi-C,仅在获得的Hi-C文库基础上增加一步目标区域的捕获,该区域的数据信息会大幅增加,可以使原本微弱的互作信息足够放大,因此可对目标区域的互作进行更深入的分析。


应用场景

特定区域的loop及loop验证

与群体GWAS数据联合,解析SNP位点调控机制

绘制特定物种所有启动子的全基因组互作图谱

物种基因组大,传统Hi-C成本太高

融合基因的互作验证


实验原理

使用甲醛处理细胞,固定DNA的构象;

裂解细胞后,使用限制性内切酶酶切DNA,产生粘性末端;

DNA末端补平修复,并同时引入生物素,标记寡核苷酸末端;

使用DNA连接酶连接DNA片段;

蛋白酶消化解除交联状态,提取DNA并随机打断为300~400bp片段;

使用链酶亲和素磁珠捕获标记的DNA,进行二代建库测序;

将Hi-C文库与设计生产的探针进行杂交,捕获得到capture Hi-C文库;

对capture Hi-C文库进行高通量测序。

图片 1

Capture Hi-C实验流程图


分析内容

CHIC分析内容

备注

1.测序质量评估

有效互作对率、顺/反式互作分布等

2.显著互作分析

显著互作类型筛选、距离分布统计、Circos图、探针互作区域(BIR)关联基因GO/KEGG富集、Motif分析等

3.差异显著互作分析

差异显著互作位点Circos图、探针互作区域(BIR)关联基因GO/KEGG富集、Motif分析等

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